RESUMO
In this study, we have identified a secreted 13 kDa lectin from Mtb (Mtb, Mycobacterium tuberculosis; sMTL-13) by homology search of a non-redundant lectin database. Bioinformatic analysis revealed that sMTL-13 belongs to the ricin-type beta-trefoil family of proteins containing a Sec-type signal peptide present in Mtb complex species, but not in non-tuberculous mycobacteria. Following heterologous expression of sMTL-13 and generation of an mAb (clone 276.B7/IgG1kappa), we confirmed that this lectin is present in culture filtrate proteins from Mtb H37Rv, but not in non-tuberculous mycobacteria-derived culture filtrate proteins. In addition, sMTL-13 leads to an increased IFN-gamma production by PBMC from active tuberculosis (ATB) patients. Furthermore, sera from ATB patients displayed high titers of IgG Ab against sMTL-13, a response found to be decreased following successful anti-tuberculosis therapy. Together, our findings reveal a secreted 13 kDa ricin-like lectin from Mtb, which is immunologically recognized during ATB and could serve as a biomarker of disease treatment.
Assuntos
Antígenos de Bactérias/imunologia , Proteínas de Bactérias/imunologia , Lectinas/imunologia , Mycobacterium tuberculosis/imunologia , Tuberculose Pulmonar/imunologia , Sequência de Aminoácidos , Anticorpos Antibacterianos/genética , Anticorpos Antibacterianos/imunologia , Antígenos de Bactérias/genética , Antígenos de Bactérias/metabolismo , Proteínas de Bactérias/genética , Proteínas de Bactérias/metabolismo , Sequência de Bases , Western Blotting , Humanos , Imunoglobulina G/imunologia , Imuno-Histoquímica , Lectinas/genética , Lectinas/metabolismo , Dados de Sequência Molecular , Mycobacterium tuberculosis/genética , Mycobacterium tuberculosis/metabolismo , Tuberculose Pulmonar/genética , Tuberculose Pulmonar/metabolismoRESUMO
In order to identify mediators involved in immune-mediated disease regression, the pleural cytokine and histopathological profile was evaluated in tuberculous pleurisy patients with varied disease duration and clinical presentation, previous to chemotherapy. Interleukin (IL)-10, interferon (IFN)-gamma and tumor necrosis factor (TNF) levels in pleural fluids were shown to decrease with disease time. IL-10 was positively correlated with IFN-gamma, TNF and necrosis area in pleural sections. To parallel these findings with disease regression, individuals showing fever, anorexia, and progressive exudate in the pleural cavity (active disease) were compared with patients without symptoms and with a decrease in exudate volume (regressive disease). IFN-gamma and TNF levels were lower in regressive disease, as well as reduced necrosis area in pleural sections. Our results indicate that tissue destruction and a prominent Th1 response mark the early phase of tuberculous pleurisy and suggest that down-modulation of this response, with the possible participation of IL-10, is associated with disease resolution.
Assuntos
Fibrose/metabolismo , Interleucina-10/metabolismo , Necrose/metabolismo , Tuberculose Pleural/metabolismo , Adolescente , Adulto , Idoso , Progressão da Doença , Feminino , Humanos , Masculino , Pessoa de Meia-IdadeRESUMO
Com o objetivo de avaliar se a retirada de maior número de fragmentos pleurais em um único sítio (A), bem como se a biópsia em um segundo sítio (B) da sua superfície, através do mesmo orifício cutâneo, acrescenta em rendimento diagnóstico aos três fragmentos habitualmente retirados, conduzimos um estudo prospectivo no Hospital Octávio Mangabeira, envolvendo 115 pacientes com indicação de biópsia pleural. Os fragmentos pleurais foram colocados em três frascos distintos: FRA1-3 = 3 primeiros fragmentos, FRA4-8 = 5 fragmentos subseqüentes e FRB1-5 = 5 fragmentos em segundo sítio da superfície pleural. Era retirada a agulha até o subcutâneo, feitas inclinação lateral e reintrodução no espaço pleural. A análise dos fragmentos provindos do FRA1-3 evidenciou granuloma em 72/92 casos de tuberculose (78,3 por cento) e no FRA4-8 e FRB1-5, em 74/92 casos (80,5 por cento). Em 6/92 pacientes foram encontrados pleurite inespecífica no FRA1-3 e granuloma no FRA4-8, resultando em acréscimo diagnóstico de 8,3 por cento (6 aos 72 pacientes). Em 7/92 pacientes (7,6 por cento) a HP foi inespecífica no sítio A e mostrou granuloma no sítio B, resultando em acréscimo diagnóstico de 9,0 por cento (7 aos 78 pacientes). A concordância histológica intra-observador teve um índice kappa de 0,62 (0,54 a 0,70) e interobservador de 0,64 (0,56 a 0,72). Concluímos que a realização de múltiplas biópsias em dois sítios diferentes da superfície pleural diagnosticou 13 pacientes que não obteriam diagnóstico definitivo se fossem retirados apenas três fragmentos pleurais, resultando em incremento diagnóstico de 18,0 por cento (13 aos 72 diagnosticados no FRA1-3), sendo considerado significativo do ponto de vista médico e social.
RESUMO
Com o objetivo de avaliar a apresentaçäo clínica-radiográfica, variáveis preditoras de tuberculose nos pacientes submetidos a biópsia pleural a seco (BPS), bem como avaliar sua utilidade e complicaçöes, foi conduzido um estudo retrospectivo no Hospital Octávio Mangabeira, em que foram analisados 107 pacientes consecutivos submetidos a esse exame. Um total de 108 biópsias (um paciente teve ambos os hemitórax biopsiados) foi realizado com agulha de Cope. Os 107 pacientes obtiveram os seguintes diagnósticos: a) tuberculose (n = 66); b) provável tuberculose (n = 4); c) neoplasia (n = 2); d) parapneumônico (n = 3); e e) indeterminado (n = 32). Apresentavam média de idade de 34,5 ñ 15,4 anos, sendo 67 (62,6 por cento) do sexo masculino. Para fins de análise, os pacientes com diagnóstico de tuberculose (certeza + probabilidade) foram comparados com os de outros diagnósticos (miscelânea). O primeiro grupo teve idade menor (p < 0,01), presença de expectoraçäo menos freqüente (p < 0,01), referia menos tuberculose no passado (p = 0,04) e foi mais reativo ao PPD (p < 0,01). Näo houve diferença entre os grupos quando analisada a extensäo do comprometimento pleural e sua variaçäo no período observado. A presença de infiltraçöes acinares em lobos superiores correlacionou-se com o diagnóstico de tuberculose nos 13 pacientes em que esteve presente. Fragmentos pleurais estavam presentes em 92,6 por cento dos casos (100/108) e o diagnóstico foi obtido na primeira biópsia em 59,3 por cento (64/108). Ocorreram dez complicaçöes de pequena gravidade (9,3 por cento) ns 108 biópsias: seis escarros sanguíneos, três pneumotórax pequenos e um efisema subcutâneo moderado. Os autores concluem que, à exceçäo das infiltraçöes acinares em lobos superiores, ocorre ampla superposiçäo entre os grupos quanto aos diversos indicadores preditivos de tuberculose, näo permitindo diagnóstico clínico seguro, reforçando a necessidade da biópsia. A BSP oferece rendimento diagnóstico satisfatório em áreas com alta prevalência de tuberculose e é relativamente segura se realizada por profissinal experiente
